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靜宜大學 食品營養學系 張珍田所指導 林文澤的 綠竹筍重組幾丁質酶催化特性及固定化研究 （2011），提出M2R J-5關鍵因素是什麼，來自於幾丁質酶、固定化、酵素。

而第二篇論文靜宜大學 食品營養學系 張珍田所指導 羅于星的 綠竹筍(Bambusa oldhamii)殼一種新穎幾丁三糖酶之純化及性質研究 （2011），提出因為有 綠竹筍、幾丁三糖酶、生化性質、轉醣基反應的重點而找出了 M2R J-5的解答。

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接下來讓我們看這些論文和書籍都說些什麼吧：

除了M2R J-5，大家也想知道這些：

綠竹筍重組幾丁質酶催化特性及固定化研究

為了解決M2R J-5的問題，作者林文澤 這樣論述：

本研究由帶有綠竹筍第三類型幾丁質酶cDNA 之甲醇酵母培養液經由硫酸銨劃分（50-70% saturation）、Sephacryl S-100 HR膠體過濾層析、Rotofor cell製備式等電焦集電泳、Phenyl-Sepharose 6 Fast Flow疏水性層析及Con A-Sepharose 4B親和性層析等連續純化步驟，獲得兩種重組幾丁質酶異構酶A和B，以SDS-PAGE電泳及活性染色測得異構酶A和B之分子量分別為36.1 kDa及30.8 kDa，以pNP-β-GlcNAc4為基質，測得異構酶A和B之最適pH 為3-4；異構酶A之動力學參數Vmax和 Km 為8.36 m

ole pNP min-1mg-1和3.89 mg/mL；異構酶B之動力學參數Vmax和 Km 為0.87 mole pNP min-1mg-1和0.48 mg/mL。以Dixon-Webb作圖 (log VmH+/KmH+ versus pH 和log VmH+ versus pH ) 分析，顯示二異構酶活性中心有兩個質子可解離基團參與基質之結合及轉換，此二基團之pKa 為pH 2.9-3.1及pH 4.5-5.0。二異構酶亦可水解幾丁聚醣，水解產物主要為低分子量幾丁聚醣 (12.6 kDa-44.6 kDa) 。純化之異構酶A和B可固定於經戊二醛活化之磁性Fe3O4奈米粒子，固定化後二

異構酶水解乙二醇幾丁質之最適pH (pH 3-4) 並未改變，但最適溫度顯著增加，固定化可顯著增加酵素分子之熱穩定性。二固定化異構酶亦可降解幾丁聚醣，在低分子量幾丁聚醣製備上具有應用潛力。

綠竹筍(Bambusa oldhamii)殼一種新穎幾丁三糖酶之純化及性質研究

為了解決M2R J-5的問題，作者羅于星 這樣論述：

本研究將新鮮採收綠竹筍置室溫(25℃±2℃)儲存12小時，儲存後綠竹筍殼所含幾丁三糖酶，經由緩衝液萃取、硫酸銨劃分(0~70％飽和度)、DEAE-Sephacel 離子交換層析、Ploybuffer exchanger PBE-94 等電焦集層析以及 Superdex 75 prep grade 膠體過濾層析等連續步驟純化，獲得一純化之幾丁三糖酶，經由此等步驟純化，可使酵素純化提高11倍，並獲得14％之酵素活性回收率。 以膠體過濾法測得純化之幾丁三糖酶之分子量為123 kDa，等電焦集電泳測得等電點為4.8，以4-MU-GlcNAc3為基質，測得幾丁三糖酶水解基質之最適pH為2~4，

最適溫度為60℃，動力學參數Km和Vmax分別為4.7μM和189.8 nmole min-1mg-1。以Dixon-Webb作圖(logVmax H+/KmH+ versus pH and Vmax H+ versus pH)分析pH對酵素動力學參數影響，結果顯示酵素活性中心可能有兩個pKa為3和4之質子可解離基團參與基質之結合和轉換反應，化學修飾劑Woodward’s Reagent K及Chloramine T強烈抑制酵素活性，顯示aspartic acid 、glutamic acid 和tryptophan可能位於酵素活性中心或其附近。 幾丁三糖酶之酵素活性顯著受過量4-MU-

GlcNAc3基質之抑制，於水溶液中幾丁三糖酶可有效催化pNP-GlcNAc2寡糖基轉移至4-MU-GlcNAc分子糖基之4-位置，幾丁三糖酶之過量基質抑制酵素活性可能與基質分子形成轉醣基反應有關。

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