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應用芽孢桿菌防治落花生冠腐病與白絹病之研究

為了解決桃園農改場土壤檢測的問題，作者廖昭榕 這樣論述：

落花生（Arachis hypogaea Linn）為臺灣重要的雜糧作物之一，栽培過程中，不論在葉片、莖、根莖部或果莢常會受到真菌性病原菌的侵害。根據本研究從雲林地區落花生田間所採集的病株根莖部，經分離鑑定及運用柯霍氏法則（Koch's postulates）確立病原性；顯示主要病原以A. niger及S. rolfsii之比例最高。為減少化學藥劑之過度使用，本論文擬採用生物防治法來防治此兩種病害；亦即擬從實驗室保存的堆肥菌株中，篩選出同時具有抑制此兩種病原菌之拮抗菌株。試驗首先從實驗室菌種保存庫中活化堆肥菌株100支，以平板對峙方法篩選出6支具有抑制A. niger之拮抗菌株後，並測試是否

也具有效抑制病原菌S. rolfsii之效果。結果顯示，此6支菌株同樣對病原菌S. rolfsii生長有抑制效果。經進一步測試此六支拮抗菌株在培養不同天數下所產生的代謝物質分別經兩倍稀釋製成的代謝液培養基，觀察其抑菌能力的差異度，顯示僅2-8(2)、B9及CB2-6三支菌株具有抑制此二病原菌菌絲生長有較優之表現；經測定其不同分解酵素種類及整體特性及分子鑑定，顯示2-8(2)及CB2-6菌株為液化澱粉芽孢桿菌 ( B. amyloliquefaciens )，另一菌株B9為枯草芽孢桿菌 ( B. subtilis )；三株菌株皆可分泌嵌鐵化合物、纖維分解酶、蛋白酶、澱粉酶。為了解這三菌株培養代謝

物含量及抑菌能力，分別檢測在不同天數下，其二次代謝產物經五倍、十倍、二十倍稀釋製成的代謝液培養基，觀察各別抑菌效果，實驗結果僅菌株2-8(2) 在經過稀釋二十倍後仍具有較佳的抑菌能力，顯示此菌株應有含量較高的代謝產物。本試驗進一步檢測代謝物含量，即利用薄層層析 ( TLC ) 與高效液相層析 ( HPLC ) 定性及定量分析iturin A產量，可確定培養之代謝液中含有iturin A之存在，主要是與iturin A標準品之Rf值皆為0.37；進一步以HPLC定量測定，結果顯示三支拮抗菌株皆在三至五天時有最高濃度iturin A的產生，其中以菌株2-8(2) 於第四天時有最高濃度6200 pp

m；運用顯微鏡觀察iturin A與病原菌之間作用，顯示iturin A能使病原菌細胞壁分解及造成菌絲不正常膨大等現象。溫室及田間試驗，三支拮抗菌株分別以培養四天的帶菌培養液及過濾無菌體培養液進行測試防治效果，經由兩次溫室試驗結果，得知試驗組與控制組相比較，花生幼苗存活率皆提高20 - 50 %，根部也明顯生長較佳；此外田間試驗結果顯示試驗組之病害發生率皆比空白組來的低，其中以菌株2-8(2) 培養液處理之組別效果最佳，病害發生率與對照組比較可降低約64 %，果莢產量增重了近65 %。

創新與循環型有機肥料製作

為了解決桃園農改場土壤檢測的問題，作者黃冠文 這樣論述：

農產品生質廢棄部分，常佔總植株95%以上。如何將農廢循環並作有效應用，是全球性問題。此外，全球糧食需求日增，導致種植所需化肥使用量逐年攀升，但長期施用化肥易導致土壤酸化、結構變異、微生物量與族群改變及作物養分不易吸收等種植上問題。相關農廢中，果樹種植所修剪出的廢棄枝條，如在空地燃燒會造成空氣污染、如在農地堆置會變成農民種植障礙，需能有更合宜的問題解決方法。為此，本研究擬利用果樹枝條經破碎悶燒所製成生物炭與煙霧冷凝液，用於新型有機肥研製，並完成下列三項目的，包括: 研究新型有機肥材料中養分的吸脫附量，利用農廢所生產之生物炭及煙霧冷凝流，研製新型有機肥料，及以研制新型有機肥，測栽培作物生長情形。

其它也將針對有機質肥料營養鹽成份與其釋放及吸附特性、生物炭與煙霧冷凝液添加效益、使用因子實驗組，並分析營養鹽、抑菌及現地種植數據等，進行研究測試。 研究結論如下：(1)燒製每公斤廢棄棗枝的生物炭產率為500 g、可產冷凝液100 mL。所燒製生物炭pH為7.9，每克可吸附氮2.88 mg; 另所產出的SCL含Phenol, 2-methoxy-、Phenol, 2,6-dimethoxy-、2-Methoxy-5-methylphenol等揮發性抑菌有機物具，其中以含量5%的SCL稀釋液，其抑菌效果較75%酒精高出1.5倍; (2)23全因子實驗顯示，添加生物炭會提高水中鉀和磷濃度，添加肥料

會增加水中氮和總菌落數量，另添加SCL則會增加水中氮量，但減少菌落數量。此外，有機質肥料及生物炭添加，對鉀元素無吸附能力，有機質肥料則會吸附磷1.22 mg-P/g，生物炭吸附氮2.88 mg-N/g，故兩材料間具有互補性; (3)最適循環型有機肥配方如下: 有機質肥料及生物炭重量比為5：1，且每公斤有機肥中加入30.25 mL的SCL原液，可抑制肥料中菌量生長。此外，該有機肥，在兩日內水中釋放氮磷比可維持在1:1，且其兩天總釋放量分別為0.33 mg-N/g-2day及0.32 mg-P/g-2day。最後，現地種植結果發現，添加有機質肥料土壤能降低其結皮效應，並抑制植株周圍雜草生長。另，種

植30 day後，萵苣存活率CF組 (100%) > OF=MOF組 (90%) > Blank組(75%)，平均單株萵苣鮮重為CF組 (3.88 g) > OF組 (3.50 g) > MOF組 (2.94 g) > Blank組 (2.12 g); 種植40 day後的香葉萬壽菊其存活率為OF組= MOF組(83%) > Blank組 (50%) > CF組(17%)，另於植物主莖直徑較空白組的增量方面MOF組 (1.1 mm) > OF組 (0.9 mm) > CF組 (-0.3 mm)，植株抽高長度為CF組 (13.5 cm) > MOF組( 5.2 cm) > OF組 ( 3.8 c

m) > Blank組(3.5 cm)。